TBI建模的方式
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发布时间：2022-04-21 06:01
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时间：2022-06-18 09:14
模式动物品系：SPF级SD大鼠，健康，雄性，体重为180g~200g
实验分组：实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
实验周期：7d
建模方法
1. 称量大鼠，腹腔注射水合氯醛（15%）350mg/kg麻醉，头部正中剃毛后用碘酒及酒精擦拭手术区域。
2. 沿头部正中稍偏右切开头皮约2cm，钝性分离软组织及骨外膜后暴露颅骨，在人字缝前方2 mm，颅骨中线旁2 mm，用颅骨钻打开直径为4 mm的圆形骨窗，保持硬脑膜完好无损，采用自由落体撞击至脑挫伤的方法。
3. 用一个40g的金属重物自25cm高处垂直坠落，撞击置在硬脑膜上的圆柱体，致伤冲击力为 1000g·cm造成右顶叶脑挫裂伤，致伤面积为4mm×4mm，致重度脑损伤，然后用骨蜡封闭骨窗，缝合头皮。
4. 待大鼠苏醒后自由饮水，正常饲养。
5. 对照组仅作右顶叶相应部位颅骨开窗，不致伤。
样本采集：
1.血液标本留取：分别于术后24h、72h及7d水合氯醛麻醉大鼠后,于下腔静脉取血2ml，室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。
2.脑组织标本留取：取脑后用4%多聚甲醛溶液固定，蔗糖溶液脱水后，经OCT包埋做冰冻切片，切片10um。
模型评价
1.认知能力的检测
颅脑损伤后大鼠的神经功能受到损伤，认知能力也会受到影响。术后应用Morris水迷宫对各组大鼠进行为期6天的训练后开始实验，以排除对环境不适应造成的应激影响,剔除不健康的大鼠。
2.细胞凋亡检测
TBI 会产生大量的细胞凋亡。凋亡是发生在多细胞有机体中的一种程序性的细胞死亡过程，其中多种生化过程会引起细胞特征性的改变，特别是形态学上的改变，最后导致细胞死亡。用TUNEL法检测细胞凋亡。
