提取小鼠胰腺组织RNA时用到的盐酸胍和β-巯基乙醇具体怎么配置的？浓度和比例是多少？
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发布时间：2022-04-23 09:37
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时间：2023-10-09 17:12
如需编辑回答或插入图片，请点击标题到问题详情页1. 所含试剂：
（1）胍盐：a.盐酸胍；b. 异硫氰酸胍；
作用：强烈的蛋白质变性剂；
（2）重蒸酚
★区别于饱和酚
重蒸酚加入0.1%的8-羟基喹啉(作为抗氧化剂)，并用等体积的0.5mol/L Tris-Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris-Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上，主要用于DNA的抽提。
因为苯酚是酸性的，酸性条件（pH<7）下DNA会分配于有机相，故不能用重蒸酚。本实验中Trizol溶液pH<7，故要使用重蒸酚。适合RNA的抽提。
作用：有机溶剂；蛋白质变性剂；
个人觉得不要自己配了还是买trizol 试剂盒吧，自己配的麻烦还不容易操作。追问我们已经买好了盐酸胍和β巯基乙醇，用来在trizol基础上进一步抑制RNA酶活性，变性蛋白用的，就用传统的trizol法效率很低，所以加了这两种试剂，但是不知道怎么用~
追答...如果你加的trizol 量足够多，你说的效率低情况不太可能发生，如果RNA有降解那也不太可能是这方面的原因，你可以多斟酌一下你的其他实验因素，RNase 真的是无所不在。。。
