PCR引物设计，如何进行编辑？
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引物的3“一般要求非常稳定，尤其是最后几个碱基，一定要求保守，因为如果有一个不保守，你就可能扩增出别的片段，一般来说，你对那个物种非常确定（就是序列是已知的），引物3“端以G结尾比较好，如果怕扩不出来，可以以A/T结尾增加扩增出片段的可能性，因为G=C氢键有3个，而A=T只有两个，前者要稳定些。相对而言，5'端不需要那么保守，如果你要考虑上下游引物之间的GC%，Tm比较接近的话，可以在5'端加碱基或者酶切位点。追问我记得3‘端最好是T，最好不要是A，G和C介于中间。
能不能在3’端加碱基从而调整GC%和Tm值。
prime premier 5.0中，正向引物好像不能在5‘端加序列后analyze。
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