药物研究 Ｔｈｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｓｔｕｄｙ 中国民族民间医药 Ｃｈｉｎｅｓｅ ｊｏｕｍａｌ ｏｆ ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ ・２５・ ＨＰＬＣ法测定理气解郁丸中橙皮苷的含量 施明王业盈 南京２１００１２ 南京同仁堂药业有限责任公司，江苏【摘要】 目的：研究测定理气解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，以甲醇一０．１％磷酸溶液（４５：５５）为 流动相；流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长为２８３ｎｍ。结果：橙皮苷线性范围为０～１．１４０１￣ｇ，平均回收率为１００．３％，ＲＳＤ＝２．６％。结论：采用 高效液相色谱法测定理气解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、结果准确、操作简便的优点，可以用于理气解郁丸的质量控制。 【关键词】 理气解郁丸；ＨＰＬＣ；橙皮苷 【中图分类号】Ｒ２８４．１ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１００７—８５１７（２０１４）０６—００２５—０２ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ ｉｎ Ｌｉｑｉｊｉｅｙｕ ｐｉｌｌｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｓｈｉ Ｍｉｎｇ Ｗａｎｇ Ｙｅ—ｙｉｎｇ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｔｏｎｇｒｅｎｔａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＣＯ．ＬＴＤ．Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１２，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ ｉｎ Ｌｉｑｉｊｉｅｙｕ ｐｉｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ一０．１％ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（４５：５５）．Ｔｈｅ ｌｆｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １ ｍＬ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ａｔ ２８３ ｎｍ．Ｒｅ－ ｓｕｉｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ Ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ ｗａｓ ０—１．１４０￣ｇ．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ １００．３％（ＲＳＤ＝２．６％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｌｉｑｉｊｉｅｙｕ ｐｉｌｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｑｉｊｉｅｙｕ ｐｉｌｌｓ；ＨＰＬＣ；Ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ 理气解郁丸是南京同仁堂药业有限责任公司研制的中 药新药，由陈皮、木香、半夏、延胡索等十余味中药组成， （ｔｘｇ）进行线性回归，得Ｙ＝１０．４３８１＋２０５７．１５５４Ｘ，ｒ＝ ０．９９９７（ｎ＝６），其线性范围为０—１．１４０￣ｇ。 ２．５精密度试验取同一批次的样品１．０ｇ，精密称定，按 ２．２．２项下的方法制备成供试品溶液，连续进样６次，体积 具有舒肝理气，解郁的功能，用于胸肋胀闷，气郁不舒。 陈皮为其君药，为有效控制药品质量，采用高效液相色谱 法测定该药品中橙皮苷的含量。 １仪器与试药 ５ ｒｎｌ，测定其峰面积 。计算ＲＳＤ为１．３５％，符合要求， 表明该方法的精密度较好。 ２．６ 重现性试验精密称取６份同一批号的样品，按照 ２．２．２项下的方法制成供试品溶液，进样体积５ｔｘｌ，注入高 效液相中测定其峰面积，计算得ＲＳＤ为１．２８％，符合要 求。表明该方法的重现性较好。 ２．７稳定性试验取同一供试品溶液，分别于０、２、４、６、 日本岛津高效液相色谱仪，ＬＣ一１０ＡＤ泵，ＳＰＤ一１０Ａ 型检测器，电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。 橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号０７０９— ９８０３）。理气解郁丸（南京同仁堂药业有限责任公司）。缺 味阴性对照样品：按照制剂工艺制备相应的缺味处方药。 色谱级甲醇（Ｆｉｓｅｒ）、双蒸水，其余试剂均为分析纯。 ２方法与结果 ８ｈ进样，进样体积５ ｌ，注入高效液相中测定其峰面积， 计算得ＲＳＤ为２．２５％，符合要求。表明供试品溶液在８ｈ 内比较稳定。 ２．８加样回收率试验取已知含量的样品约０．５ｇ，精密称 定，加入一定量的橙皮苷对照品，按２．２．２项下的方法制 ２．１色谱条件色谱柱ＳｉｎｏＣｈｒｏｍ ＯＤＳ—ＢＰ柱（５ｌｘｍ，４．６ ×２５０ｍｍ）；流动相：甲醇一０．１％磷酸溶液（４５：５５）；流 速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ；柱温：３０℃；检测波长：２８３ｎｍ。 ２．２溶液的制备 ２．２．１对照品溶液的制备取适量橙皮苷对照品，精密称 成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为 １００．３％，ＲＳＤ为２．６％，均符合要求，说明该方法可以用 于橙皮苷的含量测定。具体结果见表１所示。 表１加样回收率试验结果（ｎ＝２） 定，加甲醇制成每１ｍｌ含０．１ｍｇ橙皮苷的溶液，即得。 ２．２．２供试品溶液的制备取本品１ｇ，研细，精密称定，置 索氏提取器中，加甲醇８０ｍｌ，水浴加热提取４小时。提取 液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至５０ｍｌ量瓶中，加甲 醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得…。 ２．２．３ 阴性对照品溶液的制备取缺陈皮的样品，同供试品 溶液的制备项下操作。 ２．３干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶 液各５ ，按２．１项下的色谱条件分别进样测定，结果阴性 无干扰Ｅ２］。 ２．４线性考察精密吸取０、１、２、３、４、５ｍｌ橙皮苷对照 品溶液，将其转移至１０ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容至刻 ２．９样品含量测定取三批理气解郁丸样品各１ｇ，精密称 定，按２．２．２项下的方法制备成供试品溶液，测定橙皮苷 的含量，结果见表２所示。 （下转第２８页） 度 。分别吸取六个浓度的橙皮苷对照品溶液５ ｌ，注入高 效液相色谱仪测定其峰面积。以峰面积Ｙ对进样量ｘ 中国民族民间医药 ・药物研究 Ｔｈｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｓｔｕｄｙ ２８・ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ 疲乏力、自汗、心悸健忘、失眠多梦、面色不华、纳谷不 馨、脘腹胀满、大便溏软、舌淡胖或有齿痕、脉细弱的神 经衰弱症和白细胞减少症，治疗缺铁性贫血，慢性疲劳综 合征、慢性虚劳性疾病，癌症肿瘤化疗辅助用药、辅助治 疗骨性关节炎所致的陈旧软骨缺损，对肺气虚、心气虚、 病态窦房结综合征等心血管疾病有明显的预防和治疗作用， ［１４］谢金鲜，李上球，李爱媛，等．复方扶芳藤合剂对ＳＨＲ大鼠血压、心 率和体重的影响［Ｊ］．中国保健，２００４，１０（９）：７６４—７６５． ［１５］潘毓宁，潘洪平，吴隐雄，等．八珍汤对老龄大鼠血液流变学改善作 用的研究［Ｊ］，广西医学，１９９７，１９（４）：５８１—５８４． ［１６］但旭辉，邓家刚，吴玉强，，等．复方扶芳藤合剂对大鼠血栓形成和血 液流变学的影响［Ｊ］．广西中医学院学报，２０１１，１４（４）：３９—４２． ［１７］程胜军，李志英，阮威君，等．复方扶芳藤合剂对心衰患者心室重塑 参数及血浆ＢＮＰ的影响［Ｊ］．广西中医药，２０１３，３６（４）：７—８． 抗衰延年，防治老年血管性痴呆等多种老年性疾病。临床 中发现由于复方扶芳藤合剂含糖量较高，限制了高血糖、 高血脂、高血压等忌糖人群服用，因此开发无蔗糖型的复 ［１８］张雨，常军英，张宁，等．复方扶芳藤合剂对小鼠外周血干细胞动员 作用的研究［Ｊ］．中国实验方剂学，２０１２，Ｉ８（７）：２１２—２１５． ［１９］张颖，周倍伊．复方扶芳藤合剂含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞 方扶芳藤合剂是满足临床的实际需要，具有显著的社会经 济效益和重要的现实意义。 部分患者服用复方扶芳藤合剂一段时间后，意外改善 甚至治愈了类风湿关节炎病症，估计与其所含的三萜类卫 矛醇成分有关，这方面的临床功效和药理机制值得进一步 探索研究。复方扶芳藤合剂具有广泛的药理作用和临床功 效，但其内在活性物质与药理药效及临床功效之间的关系 Ｎｏｔｃｈ信号通路的影响［Ｊ］．中国实验方剂学，２０１３，１９（１８）：２０６—２０９． ［２０］李凤文，刘荣珍，赵鹏，等．百年乐口服液安全性实验研究［Ｊ］．广 西预防医学，２００５，１１（１）：７—１０． ［２１］梁晓艳，唐秀能，胡军高，等．复方扶芳藤合剂中重金属元素测定及 其安全性评价［Ｊ］．中成药，２０１３，（１０）：２１８９—２１９５． ［２２］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｍ］．北京：化学工 业出版社，２０１０：成方制剂９１０—９１１． ［２３］曹元成，马英玲．百年乐治疗疲劳综合征［Ｊ］．中国民间疗法， １９９５，３（３）：４３． 尚未清楚，有待广大药学工作者深入研究。 参考文献 ［２４］李风行．百年乐合舒神灵治疗神经衰弱５２例［Ｊ］．广西中医药， １９９７，２０（４）：２４ ［１］王小燕，许土凯．百年乐对体外自由基清除作用的研究［Ｊ］．老年学 杂志，１９９２，１２（４）：２３６—２４０． ［２５］赵霞，何晓微，黄清．复方扶芳藤合剂对气血两虚型慢性疲劳综合征 疗效观察［Ｊ］．中医药信息，２０１３，２０（４）：８８—８９． ［２６］赵慧，李燕飞，李丽，等．从百年乐药物组方浅析其在气血两虚中的 应用［Ｊ］．中国药物经济学，２０１３，６（６）：２７４—２７５． ［２７］邓家刚．复方扶芳藤合剂异病同治举隅［Ｊ］．广西中医药，２０００。２３ （３）：４７—４８． ［２］雷肖环，杨品纯．百年乐对小鼠血红蛋白含量的影响［Ｊ］．广西中医 药，１９８９，１２（３）：３８—３９． 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